蛋白質(zhì)藥物制劑的基本劑型為注射劑和凍干粉針劑。藥物溶液或混懸液一般通過(guò)胃腸外途徑注射給藥，注射方式包括靜脈（IV）注射、皮下（SC）或肌內(nèi)（IM）注射等。與靜脈注射相比，皮下或肌內(nèi)給藥方式可有效減少給藥時(shí)間，降低治療成本，提高患者順應(yīng)性且改善患者和醫(yī)療服務(wù)提供者的方便性。皮下（通常低于約2ml）或肌內(nèi)（通常低于約5ml）注射需要小體積，所以必須對(duì)蛋白質(zhì)溶液進(jìn)行濃縮以提高制劑的有效蛋白質(zhì)劑量。隨著濃度的增加，蛋白質(zhì)分子在溶液中會(huì)發(fā)生聚集、變形、交聯(lián)、脫酰胺、異構(gòu)化、氧化及剪裁等現(xiàn)象，導(dǎo)致粘度呈現(xiàn)近似指數(shù)及的上升。過(guò)高的粘度會(huì)增加蛋白質(zhì)制劑的制備及使用難度，導(dǎo)致患者注射部位的不適反應(yīng)，在一定程度上影響蛋白質(zhì)制劑的物理和化學(xué)穩(wěn)定性。由于蛋白質(zhì)的高粘度和其他性質(zhì)所帶來(lái)的問(wèn)題，多種藥學(xué)上重要的高分子量蛋白質(zhì)諸如單克隆抗體目前經(jīng)由靜脈輸注給藥的方式遞送高劑量的蛋白質(zhì)。

通過(guò)添加粘度降低劑，降低蛋白質(zhì)制劑的粘度有助于提高泵送、濃縮、過(guò)濾等加工工藝的效率；降低制劑的注射力，改善制劑的可注射性和/或患者順應(yīng)性、方便性和舒適性，避免引起給藥部位的刺激跡象；增加制劑中蛋白質(zhì)的濃度及給藥?kù)`活性，降低蛋白質(zhì)的給藥頻率；提高制劑的生物利用度；影響藥物動(dòng)力學(xué)，有效降低給藥劑量的Cmax（指在給藥劑量后且在給藥后續(xù)劑量前的最大血漿濃度），使制劑毒性降低。因此，優(yōu)化蛋白質(zhì)藥物制劑的配方，降低溶液粘度，是蛋白質(zhì)藥物開(kāi)發(fā)中至關(guān)重要的。

測(cè)試儀器

本文使用DVNext錐板流變儀（如圖1所示）測(cè)量一種高濃縮低粘度的液體蛋白質(zhì)藥物制劑的粘度。幫助用戶建立蛋白質(zhì)制劑的生產(chǎn)及制備工藝過(guò)程中產(chǎn)品質(zhì)量控制的粘度測(cè)試方法，并Rheocalc T軟件連接主機(jī)，進(jìn)行程序編輯及數(shù)據(jù)采集，繪制粘度變化曲線。

圖1：DVNext錐板流變儀

錐板流變儀適用于微量樣品的粘度測(cè)試，測(cè)試所需樣品體積僅為0.5-2.0 mL（具體的樣品量與所使用的轉(zhuǎn)子型號(hào)相關(guān)），可有效節(jié)約測(cè)試成本；錐板流變儀使用錐形轉(zhuǎn)子及配套的樣品杯，可以計(jì)算精確的剪切率和剪切應(yīng)力，得到絕對(duì)粘度；樣品杯中內(nèi)置RTD溫度探針，通過(guò)外接循環(huán)水浴，可實(shí)現(xiàn)測(cè)試過(guò)程中樣品溫度的控制和測(cè)量；由于樣品量很少，可快速恒溫，有效提高測(cè)試效率。TC-650 AP循環(huán)水浴系統(tǒng)（圖1-1）的控溫精度最高可達(dá)0.01℃，為粘度測(cè)試提供準(zhǔn)確及穩(wěn)定的溫度條件。

圖1-1：TC-650 AP循環(huán)水浴

方法與結(jié)果

調(diào)節(jié)錐板流變儀的轉(zhuǎn)子與樣品杯之間的間隙，然后吸取一定量的液體蛋白質(zhì)制劑于錐板流變儀的樣品杯中，連接流變儀主機(jī)和TC-650 AP水浴循環(huán)系統(tǒng)，設(shè)置測(cè)試溫度為25℃。在Rheocalc T 軟件上編輯相應(yīng)的測(cè)試程序，待樣品溫度穩(wěn)定后開(kāi)始測(cè)量。選擇“Multi Point"模式進(jìn)行數(shù)據(jù)采集，觀察測(cè)試過(guò)程中數(shù)據(jù)讀取及溫度控制的穩(wěn)定性。根據(jù)圖2可知，使用水浴控溫時(shí)，測(cè)試穩(wěn)定性非常好，12個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)的粘度平均值為26.19 cP，RSD僅為0.05%。扭矩讀數(shù)平均值為43.6%，表明可以使用該測(cè)試方法進(jìn)行產(chǎn)品的粘度控制。